Como la mayoría de los adolescentes, Peter Parker (Andrew Garfield) está intentando encontrar su lugar en el mundo. También se inicia en el amor junto a una nueva compañera de clase llamada Gwen Stacy (Emma Stone). Pero por encima de todo, quiere descubrir por qué sus padres desaparecieron sin dejar rastro. La búsqueda le lleva hasta el laboratorio del doctor Curt Connors (Rhys Ifans), ex socio de su padre en la compañía Oscorp. Ahora, Peter Parker tendrá que enfundarse el traje de Spider-Man para enfrentarse a vida o muerte con el Lagarto, el poderoso alter-ego de Connors.
